原理：在变性条件下将待检的RNA样品进行琼脂糖凝胶电泳，继而将在凝胶中的位置转移到硝酸纤维素薄膜或尼龙膜上，固定后再与同位素或其它标记物标记的RNA探针进行反应。

用途：检测样品中是否含有基因的转录产物（mRNA）及其含量。

实验方法：

[仪器、试剂、材料]

（一）仪器恒温水浴箱，电泳仪，凝胶成像系统，真空转移仪，真空泵，UV交联仪，杂交炉，恒温摇床，脱色摇床，漩涡振荡器，分光光度计，微量移液器，电炉（或微波炉），离心管，烧杯，量筒，三角瓶等。

（二）材料总RNA样品或mRNA样品，探针模板DNA(25ng)，尼龙膜

（三）试剂：NorthernMaxKit（(100cm2膜面积加入20ml洗膜溶液)，室温下，摇动洗膜5min两次。

2．高严紧性洗膜：加入HighStringencyWashSolution#2(100cm2膜面积加入20ml洗膜溶液)，42℃摇动洗膜20min两次。

13．曝光：

1．将膜从洗膜液中取出，用保鲜膜包住，以防止膜干燥。

2．检查膜上放射性强度，估计曝光时间

3．将X光底片覆盖与膜上，曝光

4．冲洗X光底片，扫描记录结果。

14．去除膜上的探针：将200%SDS（由DEPC水配制）煮沸后，将膜放入，室温下让SDS冷却到室温，取出膜，去除多余的液体，干燥后，可以保存几个月。

15．杂交结果

操作应该小心，但不必紧张。用于RNA电泳、转膜的所有器械、用具均须处理以除去RNAse酶，以免样品的降解。转膜时，注意膜和多孔渗水屏之间不要有气泡