
目前,婴幼儿配方奶粉多以牛乳、羊乳为基料,然而其低聚糖含量相对较低,比如在成熟乳中,母乳低聚糖浓度下降至5~20g/L,但仍比牛乳低聚糖高约100~1000倍。

▲成熟母乳、牛乳和山羊乳中的宏量元素和低聚糖比较²
因此,在婴幼儿配方奶粉研发中,为了更好地模拟母乳低聚糖(HMOs)的作用,婴幼儿配方奶粉中通常添加低聚半乳糖(GOS)和低聚果糖(FOS),但其在结构上还是与母乳低聚糖(HMOs)有很大不同。

北京三元食品股份有限公司首席科学家、副总经理,国家母婴乳品健康工程技术研究中心、北京市乳品工程技术研究中心主任陈历俊团队建立了多种低聚糖检测方法,其中“乳中游离低聚糖的高通量定量测定方法”,已获得国内外专利授权(/AU2020101064A4)。
该专利方法具有简单、易操作、通量高且可靠等优点,助力中国母乳研究,为婴幼儿配方奶粉的创新研发提供科学的依据。
1)将乳样品涡旋混匀后,用超纯水调整至总碳水化合物浓度20mM以下,将调整后的样品转移至超滤离心管中离心分离或在4℃下低温离心脱脂,得到游离低聚糖溶液。
2)用2-氨基苯甲酰胺和2-甲基吡啶-N-甲硼烷溶液对分离得到的游离低聚糖溶液中的游离低聚糖进行荧光标记,其中:2-氨基苯甲酰胺溶液和2-甲基吡啶-N-甲硼烷溶液中使用的溶剂为体积比85:15的二甲基亚砜和醋酸混合溶剂,再用超纯水将低聚糖浓度稀释至线性范围之内,然后用超高效液相色谱-荧光检测法检测,根据峰面积利用外标法建立的线性回归方程计算得到待测样品中游离低聚糖的含量。

①同时对15种游离低聚糖进行检测,并且对15种游离低聚糖都具有较高的灵敏度和很好的分离效果
②对低聚糖的多种结构异构体具有很好的分离效果
能够将2'-FL与3-FL、LNT与LNnT基线分离,对LNFPI、LNFPII、LNFPIII、LNFPV等结构异构体也具有很好的分离度。
③准确性、回收率、精密度高
在对样品进行超滤离心或低温离心脱脂之前,先进行了10倍以上稀释,将乳脂肪的体积效应对乳低聚糖的定量检测结果的影响降低至0.5%以下;批内测定的峰面积和保留时间的RSD分别低于3.0%和0.08%;批间测定的峰面积和保留时间的RSD分别低于3.0%和0.14%。
④样品制备方法简单、易操作、通量高,具有很好的可靠性,可在3h内完成大批量样品的制备
持续探索检测方法,为行业高质量发展提供有力的技术支撑,助力婴幼儿配方奶粉创新升级。
---------参考文献---------
[1]陈历俊,黄训文,杨春英,等.乳中游离低聚糖的高通量定量测定方法:201910530014.7[P].
[2]杨宝雨,赵军英,乔为仓,等.母乳低聚糖的研究进展[J].中国食品学报,2021.
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